IMDM的使用步驟

　　IMDM培養(yǎng)基在DMEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加了硒、HEPES、丙酮酸鈉以及額外的氨基酸和維生素，并用硝酸鉀代替了硝酸鐵，營養(yǎng)非常豐富，非常適合于快速增殖，高密度細(xì)胞培養(yǎng)。IMDM培養(yǎng)基不僅可以培養(yǎng)有特殊營養(yǎng)要求的細(xì)胞，還可以作為一些特別的無血清培養(yǎng)基的基礎(chǔ)液。IMDM培養(yǎng)基的使用方法：

　　1、準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

　　2、校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線，加熱溶解，補(bǔ)充水分，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測定。用1NNaOH和1NHCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

　　3、過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用IMDM(含雙抗)紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。

　　4、分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)，塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌。

　　5、滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*底滅菌的目的。